修饰引物

我们提供包括5'修饰、3'修饰和内部修饰的多种修饰引物合成服务。

磷酸化（Phosphorylation）

5'磷酸化可用于接头，克隆和基因构建以及连接酶催化的连接反应。3'磷酸化可抗3'外切酶消化的相关实验中，也用于阻止DNA聚合酶催化的DNA链延伸反应。

生物素（Biotin）

卵白素-生物素（avidin-biotin）技术应用广泛，包括用于非放射性免疫分析来检测蛋白质，胞内化学染色，细胞分离，核酸分离，杂交检测特异性的DNA/RNA序列，离子通道构象变化的探针等。功能化的生物素还可用在已包被的固相表面的的固定。最近也在探讨将这项技术用于光降解的生物素产品。所有这些应用需要包含有一个或多个的生物素标记的的特异性寡核苷酸。

地高新 （Digoxigenin）

地高新是一种从毛地黄植物分离出来的类固醇物质，因为毛地黄植物的花和叶子是这种物质唯一自然来源，所以抗地高新抗体不会结合到其他生物物质。地高新经由一个11个原子的间臂连接到脲嘧啶的C5位置。

杂交的地高新探针可以由抗地高新抗体来检测，这个抗体一般会与碱性磷酸酶，过氧化物酶，荧光素或胶体金偶连。或者没有偶连的抗地高新抗体但偶连的抗抗体。

地高新标记的探针可用于各种杂交反应，如DNA-DNA杂交（Southern blotting），DNA-RNA杂交（Northern blotting）斑点杂交（Dot blotting ），克隆杂交，原位杂交以及酶联免疫分析（ELISA）。

氨基修饰

• 内部氨基修饰
  Invitrogen主要用C6-dT aminolinker来加到胸腺嘧啶残基上来进行内部修饰。修饰后氨基与主链相距10个原子距离，可用于进一步的标记和酶连接（如碱性磷酸酶），目前提供内部氨基修饰介导的dT-Dabcyl, dT-Biotin, 和dT-Digoxingenin 修饰。
• 5'氨基修饰
  可方便的用于制备功能化的寡核苷酸，广泛的应用在DNA芯片（DNA Microarray）和多重标记诊断系统。Invitrogen目前提供5' C6 氨基修饰和5' C12氨基修饰两种， 前者可用于连接一些即便靠近寡核苷酸也不会影响其功能的化合物，后者用于亲和纯化基团的连接和一些荧光标记尤其是当荧光可能会因标记太靠近DNA链而被淬灭时。
• 3'氨基修饰
  Invitrogen目前提供3' C6 氨基修饰。它可用于设计新的诊断探针和反义核苷酸，例如5'端可用高度敏感的32P或荧光素标记的同时3'可用氨基修饰以进行其他的连接。另外3'修饰抗3'外切酶消化从而可用于反义实验。
  

巯基（Thiol）

5'-巯基在很多方面与氨基修饰类似。巯基可用于加附各种修饰如荧光标记物和生物素。例如可以在碘乙酸和马来酰亚胺衍生物存在下来制作巯基连接的荧光探针。5'的巯基修饰主要用5'巯基修饰单体（5'-Thiol-Modifier C6-CE Phosphoramidite or the Thiol-Modifier C6 S-S CE Phosphoramidite）。用5'-Thiol-Modifier C6-CE单体修饰后必须进行硝酸银氧化以去除保护基（trityl），而Thiol-Modifier C6 S-S CE单体修饰后须用DTT将二硫键还原成巯基。

间臂（Spacer）

硫代（Phosphorthioate）

硫代修饰的寡核苷酸主要用于反义实验中防止被核酸酶降解。你可以选择全硫代，但随着硫代碱基的增加，寡核苷酸的Tm值会降低，为了降低这种这种影响，可以对引物两端2-5个碱基进行硫代修饰（许多人选择5'和3'各3个碱基进行硫代修饰。

脱氧脲嘧啶 （DeoxyUridine，dU）

脱氧脲嘧啶可以插进寡核苷酸来增加双链的熔点温度从而增长双链的稳定性。每个脱氧胸腺嘧啶被脱氧脲嘧啶替代可以增长双链熔点温度1.7°C.

脱氧次黄嘌呤（deoxyInosine，dI）

脱氧次黄嘌呤是一个自然存在的碱基，虽然不是真正意义上的通用碱基但当与其它碱基结合时会比其它碱基错配相对更稳定。脱氧次黄嘌呤与其它碱基的结合能力为dI:dC > dI:dA > dI:dG > dI:dT. 在DNA聚合酶的催化下，脱氧次黄嘌呤首选与dC结合。